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  • 2024

    1-25
    細胞學堂 | BV2細胞形態(tài)問題大揭秘

    BV2細胞系由E·Blasi于1990年建立,應用小鼠小神經(jīng)膠質細胞經(jīng)逆轉錄病毒介導轉染v-raf/v-myc獲得永生化,在模擬神經(jīng)系統(tǒng)疾病和研究相關疾病機制方面應用廣泛。BV2細胞保留有小神經(jīng)膠質細胞多種形態(tài)、表征和功能特征,免疫組化結果顯示,BV2細胞為MAC1、MAC2陽性,MAC3、膠質細胞原纖維酸性蛋白、半乳糖腦苷脂陰性。培養(yǎng)BV2細胞時,最常遇到的問題就是細胞形態(tài)異常,通常伴隨著細胞形狀改變、拉絲較多等,對大家的實驗造成影響。本期細胞學堂為大家整理了BV2細胞的培...

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  • 2024

    1-24
    細胞凋亡的幾種檢測方法

    細胞凋亡的幾種檢測方法:一形態(tài)學觀察方法1、HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現(xiàn)象。2、丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內(nèi)側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。3、臺盼藍染色:如果細胞膜不完整、破裂,臺盼藍染料進入細胞,細胞變藍,即為壞死。如果細胞膜完整,細胞不為臺盼藍染色,則為正常細胞或凋亡細胞。此方法對反映細胞膜的完整性,區(qū)別壞死細胞有一定的幫...

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  • 2024

    1-16
    疑難解析 | 2023年度直播答疑熱點匯總

    細胞培養(yǎng)過程中,我們通常會遇到各種各樣的問題,這些問題一般是多種因素造成的,如細胞密度、培養(yǎng)環(huán)境、操作方法等。2023年,普諾賽圍繞細胞培養(yǎng)問題,共舉辦了10場線上直播,吸引了萬余人觀看。直播期間,大家踴躍發(fā)言,提出了日常實驗中遇到的問題。本期直播答疑篩選出部分問題做了詳細解答。牙源性干細胞培養(yǎng)時,血清會誘導分化嗎?血清成份復雜,里面包含抑制分化的因子,也包含促進分化的因子;間充質干細胞一類成體干細胞大多可以用血清培養(yǎng),單能干細胞,用血清不會分化;胚胎干會細胞分化。血清的刺激...

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  • 2023

    12-28
    直播答疑 | 細胞培養(yǎng)答疑專場

    12月14日的直播中,普諾賽直播間為大家介紹了細胞黑點、細胞狀態(tài)變形、細胞空泡、聚團、脫落等常見問題,直播回放請至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑,從直播間提問中,篩選出部分有代表性的問題,做了詳細解答。如有其他問題,也歡迎大家在公眾號留言,我們將在線解答。消化時間過長會損傷細胞嗎?消化時間過長會導致細胞膜蛋白的改變,最直觀的表現(xiàn)就是消化后第二天漂浮細胞很多或者貼壁慢。胰酶消化不掉的,二次消化對細胞損傷小還是機械吹打對細胞損傷???建議二次消化。細胞與細胞間的連接沒有...

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  • 2023

    12-26
    細胞學堂 | A-498細胞知識盤點

    A-498(人腎癌細胞)細胞由Aaronson·S建立,是從一名52歲女性腎癌患者的腎組織中分離出的具有上皮形態(tài)的細胞系。該細胞系是一種合適的轉染宿主,在腫瘤研究中具有一定的應用價值,常作為腎細胞癌研究的模型。本期細胞學堂為大家整理了A-498細胞的培養(yǎng)條件與傳代、凍存步驟及常見應用,幫助您快速上手開展實驗。細胞形態(tài)A498細胞貼壁生長,呈上皮樣形態(tài),細胞鋪開面積大,單位面積細胞總數(shù)量少,少量細胞有觸角;低密度時可觀察到單個細胞清晰的邊緣,密度大于100%時邊緣不清晰,細胞與...

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  • 2023

    12-19
    細胞學堂 | 實驗室細胞計數(shù)指南

    細胞計數(shù)是實驗室中常見的一項操作,用于確定樣品中細胞的數(shù)量,判斷細胞數(shù)量是否滿足實驗需求。本期細胞學堂為大家整理了幾種常見的計數(shù)方法:人工手動計數(shù)法、自動細胞計數(shù)儀法,以及懸浮細胞和貼壁細胞在不同密度下的鏡下視野的參考范圍,幫助您快速上手開展實驗。1人工手動計數(shù)法即通過肉眼觀察顯微鏡視野中的細胞數(shù)量,從而進行統(tǒng)計。操作步驟1將計數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計數(shù)板上;2輕輕吹打細胞懸液,使細胞均勻分布;吸出10μL-20μL左右的細胞懸液滴在蓋片邊緣,使細胞懸液充滿蓋玻...

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  • 2023

    11-28
    直播答疑 | 懸浮細胞培養(yǎng)要點解析

    11月16日,普諾賽直播間為大家介紹了懸浮細胞的生長特點、培養(yǎng)注意事項,并通過THP-1、NK-92、NCI-H209三個細胞案例,深入講解了懸浮細胞的培養(yǎng)要點。直播回放可移步至B站-“普諾賽生物”進行觀看。本期直播答疑,從直播間提問中,篩選出部分有代表性的問題,做了詳細解答。如有其他問題,也歡迎大家在推文底部留言,我們將在線解答。Q1傳代時,細胞密度比較低,但是培養(yǎng)基又變黃了,怎么辦?細胞培養(yǎng)過程中,如發(fā)現(xiàn)細胞量較少,但培養(yǎng)基變黃較快,可以從以下3個方面進行排查:?檢查培養(yǎng)...

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  • 2023

    11-28
    細胞學堂 | 培養(yǎng)B16系列細胞必看知識點

    B16系列細胞屬于小鼠黑色素瘤細胞系,是源自C57小鼠的一種皮膚癌細胞,常用于腫瘤生物學研究。本期細胞學堂為大家整理了B16系列細胞的培養(yǎng)方法與注意事項,B16細胞黑色素的形成原因及解決方法,幫助您快速上手開展實驗。01B16系列細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)條件RPMI-1640(PM150110)+10%FBS(164210-50)+1%P/S(PB180120);生長特性貼壁生長,生長迅速,能產(chǎn)生黑色素;傳代方式0.25%含EDTA的胰蛋白酶消化2-3min,推薦傳代比例1:3-1:...

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