磷酸鹽緩沖液(PBS)的配制方法因其所需pH值的不同而有所差異。以下是一些常見pH值的磷酸鹽緩沖液的配制方法:
一、pH值為2.0、2.5和5.0的磷酸鹽緩沖液
pH 2.0的磷酸鹽緩沖液
甲液:取磷酸16.6mL,加水至1000mL,搖勻。
乙液:取磷酸氫二鈉71.63g,加水溶解成1000mL。
混合:取甲液72.5mL與乙液27.5mL混合,搖勻。
pH 2.5的磷酸鹽緩沖液
取磷酸二氫鉀100g,加水800mL,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2.5,再用水稀釋至1000mL。
pH 5.0的磷酸鹽緩沖液
取一定量的0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液,用氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH至5.0。
二、pH值在5.8至7.8之間的磷酸鹽緩沖液
pH 5.8的磷酸鹽緩沖液
取磷酸二氫鉀8.34g與磷酸氫二鉀0.87g,加水溶解成1000mL。
pH 6.5的磷酸鹽緩沖液
取磷酸二氫鉀0.68g,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液15.2mL,用水稀釋至100mL。
pH 6.6的磷酸鹽緩沖液
取磷酸二氫鈉1.74g、磷酸氫二鈉2.7g與氯化鈉1.7g,加水溶解成400mL。
pH 6.8的磷酸鹽緩沖液(含胰酶)
取磷酸二氫鉀6.8g,加水500mL溶解,用0.1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.8;
取胰酶10g,加水適量溶解,將上述兩液混合后,加水稀釋至1000mL。
或者取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液250mL,加0.2mol/L氫氧化鈉溶液118mL,用水稀釋至1000mL,搖勻。
pH 7.0的磷酸鹽緩沖液
取磷酸二氫鉀0.68g,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液29.1mL,用水稀釋至100mL。
pH 7.2的磷酸鹽緩沖液
取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液50mL與0.2mol/L氫氧化鈉溶液35mL,加新沸過的冷水稀釋至200mL,搖勻。
pH 7.3的磷酸鹽緩沖液
取磷酸氫二鈉1.9734g與磷酸二氫鉀0.2245g,加水溶解成1000mL,調(diào)節(jié)pH值至7.3。
pH 7.4的磷酸鹽緩沖液
取磷酸二氫鉀1.36g,加0.1mol/L氫氧化鈉溶液79mL,用水稀釋至200mL。
pH 7.6的磷酸鹽緩沖液
取磷酸二氫鉀27.22g,加水溶解成1000mL,取50mL該溶液,加入0.2mol/L氫氧化鈉溶液42.4mL,再加水稀釋至200mL。
pH 7.8的磷酸鹽緩沖液
方法一:取磷酸氫二鈉35.9g,加水溶解并稀釋至500mL;取磷酸二氫鈉2.76g,加水溶解并稀釋至100mL;取上述甲液91.5mL與乙液8.5mL混合,搖勻。
方法二:取磷酸氫二鉀5.59g與磷酸二氫鉀0.41g,加水溶解成1000mL。