從海馬體中分離出大鼠海馬神經元細胞;海馬體又稱海馬回、海馬區(qū)和大腦海馬體,主要負責記憶和學習。海馬神經元是海馬體中的主要細胞。它們的主要功能是參與近期記憶、情緒和內臟功能的調節(jié)。它們是阿爾茨海默病、癲癇等疾病的主要病變之一。海馬體屬于大腦的邊緣系統(tǒng),在神經系統(tǒng)疾病的學習、記憶、情緒反應和病理生理變化中起重要作用。此外,海馬體是中樞神經系統(tǒng)中神經干細胞的主要聚集區(qū)。它具有高度有序的層狀結構和神經元分布相對獨立的特點。邊界比較清晰,材料容易獲取。因此,海馬神經元體外培養(yǎng)模型被基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究人員視為理想的實驗模型。海馬神經元細胞培養(yǎng)是研究神經細胞生物學特性和外源性干擾因子(細胞因子)影響的有效細胞模型。已廣泛應用于體外神經生物學和發(fā)育生物學的實驗研究。
大鼠海馬神經元細胞細胞消化過程總結:其實絕大多數(shù)細胞只需要用胰蛋白酶潤濕洗滌即可。吸收胰蛋白酶后,無法計算的附著在細胞表面的殘留微量胰蛋白酶在37度時一般小于2分鐘,足以消化細胞(大部分小于1分鐘)。原則上,這些細胞不應與胰蛋白酶一起孵育。連續(xù)通過會對細胞造成很大的傷害。簡單的程序是PBS洗滌吸收,胰蛋白酶洗滌吸收,然后37度消化。
大鼠海馬神經元細胞使用要特別注意:(如果使用公共實驗室或接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗體培養(yǎng))
1、收到細胞后,請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基。如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%血清(原瓶培養(yǎng)基連續(xù)使用時間不得超過72小時);
2、貼壁細胞在收到當天不要立即消化。請更換細胞溶液,放入培養(yǎng)箱中孵育至次日進行消化和繼代培養(yǎng)。請優(yōu)先使用直徑6cm的培養(yǎng)皿進行繼代培養(yǎng);
3、簽字時培養(yǎng)瓶壁破裂、漏水,請及時拍照記錄并與實驗室聯(lián)系。