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拿到雞卵泡顆粒細胞應執(zhí)行以下操作

更新時間:2022-03-14  |  點擊率:1890
  雞卵泡顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,它們的增殖和分化直接影響卵巢功能活動,如卵泡的生長起始、發(fā)育、排卵、黃體形成和類固醇激素的分泌,細胞呈圓形或橢圓形。細胞總數(shù)約5×105個/瓶,細胞純度高達80%以上,不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
  從雞卵泡組織中分離出雞卵泡顆粒細胞;成熟卵泡是卵巢的結構成分之一。卵泡腔大,卵丘明顯。卵泡的子宮內(nèi)膜細胞靠近卵泡的顆粒層,它們之間有基底膜。子宮內(nèi)膜細胞呈多角形,胞質清晰,核圓形。細胞間可見許多毛細血管。外膜細胞位于最外層,多呈梭形,與周圍結締組織無明顯界限。卵泡內(nèi)的卵母細胞周圍有一層菱形或扁平細胞。當卵泡開始發(fā)育,卵細胞生長時,周圍的菱形細胞變成立方體,由單層長成多層。由于其細胞質中有顆粒,故稱為顆粒細胞。初級卵泡的顆粒細胞為單層;次級濾泡的顆粒細胞增加至多層;成熟卵泡的顆粒細胞膨脹并成為單層。顆粒細胞核大而圓,顏色深。細胞的自由表面有許多細長的突起延伸到輻射區(qū)的凹陷處。

 

雞卵泡顆粒細胞
 

 

  收到雞卵泡顆粒細胞后,檢查外包裝是否完整,細胞培養(yǎng)瓶是否完好。并執(zhí)行以下操作:
  1、用1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
  2、將細胞放入37度培養(yǎng)箱中,并在處理前預熱3-4小時,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
  3、預熱*培養(yǎng)基(包括1%雙抗體)。
  4、顯微鏡下觀察細胞生長情況,對不同倍數(shù)(40×、100×、200×各1個)的細胞進行拍照。
  5、如果細胞密度小,無菌操作,除去培養(yǎng)基。向每瓶中加入5-6ml步驟4中制備的培養(yǎng)基。將其放入37度的培養(yǎng)箱中。當細胞密度達到80%以上時,傳代培養(yǎng)。如果細胞密度大,達到80%以上,則進行傳代培養(yǎng)。
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